ДНК синтезинин эффективдүүлүгүн аныктоочу факторлор

Типтүү ДНКнын, РНКнын жана табигый эмес нуклеиндик кислоталардын синтезинде коргоону жоюу жана бириктирүү кадамы маанилүү ролду ойнойт.

Коргоодон чыгаруу кадамы катуу таянычтагы DMT тобун же мурунку нуклеозиддеги 5' гидроксил тобун органикалык кислота менен алып салуу жана кийинки кошулуу кадамы үчүн гидроксил тобун ачыкка чыгаруу.Дихлорометандагы же толуолдогу 3% трихлорассус кислотасы көбүнчө коргоону жоюу кадамын жүргүзүү үчүн колдонулат.Трихлорассус кислотасынын концентрациясы жана коргоону жоюу убактысы (блокировкалоо убактысы) акыркы продукциянын тазалыгына басымдуулук кылат.Төмөн концентрация жана блокировкалоо убактысынын жетишсиздиги DMT тобун реакциясыз калтырат, бул түшүмдү төмөндөтөт жана керексиз аралашмаларды көбөйтөт.Деблокировкалоонун узак убактысы синтезделген ырааттуулуктун депуринине алып келип, күтүлбөгөн аралашмаларды пайда кылышы мүмкүн.

Кошулуу кадамы эриткичтердин суунун курамына жана абадагы нымдуулукка сезгич.Синтездеги суунун концентрациясы 40 промилледен кем, 25 промилледен жакшыраак болушу керек.Суусуз синтез шартын сактоо үчүн нуклеиндик кислоталардын синтези нымдуулугу төмөн чөйрөдө жүргүзүлүшү керек, ошондуктан биз кардаргаАмидиттер эритилген жабдуулар, ал аба менен байланышты болтурбоо үчүн порошок же майлуу Фосфорамидитти суусуз ацетонитрилде эритет.

ДНК синтезинин эффективдүүлүгүн аныктоочу факторлор5
ДНК синтезинин эффективдүүлүгүн аныктоочу факторлор4

Фосфорамидиттердин эригени суу эмес жагдайда жакшыраак болгондуктан, реагенттерде жана амидитте изи сууну адсорбциялоо үчүн молекулярдык тузактар, аны даярдоо керек.Молекулярдык тузактар.50-250 мл реагент бөтөлкөлөрү үчүн 2 г субсивди, 250-500 мл реагент бөтөлкөлөрү үчүн 5 г, 500-1000 мл реагент бөтөлкөлөрү үчүн 10 г жана 1000-2000 мл реагент бөтөлкөлөрү үчүн 20 г сунуштайбыз.

Фосфорамидиттерди эритүү инерттүү атмосферада жүргүзүлүп, активатор реагенттерди жана ацетонитрилди алмаштырууну өз убагында бүтүрүү керек.Капкалоо жана кычкылдандыруу реагенттерин мүмкүн болушунча тезирээк колдонуу керек, ачылган реагенттер жарактуулук мөөнөтүн азайтат жана синтез учурунда азыраак активдүүлүк берет.


Посттун убактысы: 09-август-2022