Олиго синтезаторунун принциби
Молекулярдык биология жана генетика изилдөө тармактарында ДНКны синтездөө жөндөмдүүлүгү чечүүчү ролду ойнойт.ДНК синтези нуклеотиддерди белгилүү бир тартипте жайгаштыруу менен ДНК молекулаларынын жасалма өндүрүшүн камтыйт.Буга жетишүү үчүн окумуштуулар ДНК синтезатору деп аталган олигонуклеотиддердин синтезатору деп аталган күчтүү куралга таянышат.
Олигонуклеотид синтезатору – олигонуклеотиддер деп аталган кыска ДНК молекулаларын автоматтык түрдө синтездөөчү татаал аспап.ДНКнын бул кыска тилкелери адатта 10дон 100гө чейин нуклеотиддерди түзөт жана полимераздык чынжыр реакциясы (ПЦР), ген синтези, генетикалык инженерия жана ДНК секвенциясы сыяктуу ар кандай тиркемелерде маанилүү курулуш материалы болуп саналат.
Олигонуклеотид синтезаторлору деп аталган техника принцибинде иштешеткатуу фазалуу синтез.Бул ыкма биринчи жолу 1970-жылдары Нобель сыйлыгынын лауреаты доктор Марвин Карутерс тарабынан сунушталган жана ДНК тизмегинин синтезин жогорулатуу үчүн жылдар бою такталган.Олигонуклеотиддердин синтези нуклеотиддердин калдыктарын өсүү чынжырынын 5'-терминусуна этап-этабы менен кошуу жолу менен, керектүү ырааттуулук чогултулганга чейин ишке ашырылат.Ар бир кошулуу синтез цикли деп аталат жана төрт химиялык реакциядан турат:
1-кадам: Деблокировка (детритилизация)---------2-кадам: бириктирүү---------3-кадам: жабуу-----------4-кадам: кычкылдануу
Бул процесс каалаган ырааттуулук алынганга чейин ар бир нуклеотид үчүн кайталанат.Узак олигонуклеотиддер үчүн бул цикл бүт ырааттуулукту синтездөө үчүн бир нече жолу кайталанышы керек болушу мүмкүн. Синтез циклинин ар бир кадамын так көзөмөлдөө жөндөмү олигонуклеотиддердин синтезатору үчүн абдан маанилүү.Нуклеотиддер жана активаторлор сыяктуу колдонулган реагенттер синтездин так жана эффективдүү болушу үчүн жогорку сапатта болушу керек.Кошумчалай кетсек, синтезаторлор жогорку тактыктагы температураны көзөмөлдөөнү жана керектүү кошулуу реакцияларын илгерилетүү жана каалабаган реакцияларды болтурбоо үчүн башка экологиялык шарттарды талап кылат.
Олигонуклеотид толук синтезделгенден кийин, ал, адатта, катуу таянычтан ажырап, калган коргоочу топторду же кирлерди жок кылуу үчүн тазаланат.Тазаланган олигонуклеотиддер ылдый агымдагы колдонууга даяр.
Технологиянын жетишкендиктери бир эле учурда жүздөгөн, атүгүл миңдеген олигонуклеотиддерди синтездей ала турган жогорку өндүрүмдүү олигонуклеотиддердин синтезаторлорун иштеп чыгууга мүмкүндүк берди.Бул инструменттер микроаррейге негизделген синтез технологиясын колдонуп, изилдөөчүлөргө ар кандай изилдөө максаттары үчүн чоң олигонуклеотиддик китепканаларды тез арада түзүүгө мүмкүндүк берет.
Кыскача айтканда, олигонуклеотиддердин синтезаторлорунун принциптери катуу таянычка нуклеотиддерди этап-этабы менен кошууну камтыган катуу фазалык синтез ыкмаларынын айланасында.Синтез циклин так көзөмөлдөө жана жогорку сапаттагы реагенттер синтездин так жана эффективдүү болушу үчүн маанилүү.Олиго синтезаторлору ДНКны изилдөөдө маанилүү ролду ойноп, окумуштууларга ар кандай колдонуу үчүн ыңгайлаштырылган олигонуклеотиддерди түзүүгө мүмкүндүк берип, биотехнология жана генетикалык изилдөөлөрдөгү жетишкендиктерге салым кошот.
Посттун убактысы: 01-август-2023